DSpace Repository

การผลิตปริมาณสูงและการตรึงเอนไซม์อะลิฟาติกอะมิเดส สำหรับประยุกต์ใช้ในกระบวนการสลายอะคริลาไมด์และอุตสาหกรรมการผลิตกรดอะคริลิก.

Show simple item record

dc.contributor.author จิตติมา เจริญพานิช
dc.contributor.other มหาวิทยาลัยบูรพา. คณะวิทยาศาสตร์
dc.date.accessioned 2019-03-25T08:54:53Z
dc.date.available 2019-03-25T08:54:53Z
dc.date.issued 2555
dc.identifier.uri http://dspace.lib.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/941
dc.description.abstract การใช้สารพิษอะคริไมด์ที่มีแนวโน้มเป็นสารก่อมะเร็งในคนอย่างกว้างขวางส่งผลให้พบการปนเปื้อนในสิ่งแวดล้อม แต่ในความเป็นพิษของอะคริลาไมด์ยังมีจุลินทรีย์บางชนิดสามารถใช้พลังงานจากอะคริลาไมด์ในการเจริญได้ โดยเกิดการสลายอะคริลาไมด์เป็นแอมโมเนียและกรดอะคริลิก จากการทำงานของเอนไซม์อะมิเดส (EC 3.5.1.4) ด้วยปฏิกิริยาดีอะมิเนชั่น ในการศึกษาก่อนหน้ามีการใช้เทคนิคพีซีอาร์หาลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนที่กำหนดการสรางเอนไซม์อะมิเดสใน Enterobacter aerogenes ซึ่งเป็นแบคทีเรียสลายอะคริลาไมด์ชนิดใหม่สำหรับในโครงการวิจัยนี้ได้นำเทคนิคพีซีอาร์มาใช้ในการเพิ่มปริมาณชิ้นยีนที่กำหนดการสร้างเอนไซม์อะมิเดสจาก E.aerogenes และโคลนเข้าสู่ดีเอ็นเอพาหะเอื้อการแสดงออก pColdl ลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนอะมิเดสที่โคลนได้มีชนาด 726 คู่เบส ที่สามารถคาดเดาเป็นกรดอะมิโนจำนวน 242 ตัว ริคอมบิแนนท์อะมิเดสที่โคลนได้มีการแสดงออกขนาด 28 กิโลดาลตันในเซลล์ให้อาศัย Escherichia coli DH5 แต่มีการแสดงออกที่มากเกินไปจนจับกันเป็นก้อนตกตะกอนภายในเซลล์ในรูปของอินคลูชั่นบอดี้ โดยความเข้มข้นของ IPTG การเติมกลูโคส แลคโตสและกลีเซอรอล และการสแดงออกที่อุณหภูมิต่ำไม่สามารถลดการแสดงออกของริคอมบิแนนท์อะมิเดสในรูปของอินคลูชั่นบอดี้ในเซลล์ได้ทั้งหมด th_TH
dc.description.sponsorship งานวิจัยนี้ได้รับทุนสนับสนุนการวิจัย จากงบประมาณแผ่นดิน มหาวิทยาลัยบูรพา ประจำปีงบประมาณ 2555
dc.language.iso th th_TH
dc.publisher คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา th_TH
dc.subject กรดอะคริลิก th_TH
dc.subject การโคลนยีน th_TH
dc.subject สารอะคริลาไมด์ th_TH
dc.subject สาขาวิทยาศาสตร์เคมีและเภสัช th_TH
dc.title การผลิตปริมาณสูงและการตรึงเอนไซม์อะลิฟาติกอะมิเดส สำหรับประยุกต์ใช้ในกระบวนการสลายอะคริลาไมด์และอุตสาหกรรมการผลิตกรดอะคริลิก. th_TH
dc.title.alternative High-level production and immobilization of an aliphatic amidase for application i acrylamide degradation and industrial production of acrylic acid. en
dc.type Research
dc.year 2555
dc.description.abstractalternative A widespread use and indiscriminate discharge of acrylamide, a neurotoxicant and probably human carcinogen has led to their presence in environment. In spite of its general toxicity, some mocroorganisms can derive energy from acrylamide for growth. In its catabolism, acrylamide is deaminated to ammonia and acrylic acid, a process catalyzed by amidase (EC 3.5.1.4). In our previous study, a gene encoding amidase from Enterobacter aerogenes, a novel acrylamide-degrading bacterium has been identified by PCR techniques. In this study, the amidase gene of E. aerogenes was PCR-amplified and successfully cloned into the pcoldl expression vector. The open reading frame of the gene consisted of 726 nucleotides (242 deduced amino acids) were obtained. Expression of the amidase with a Mr of 28 kDa in Escherichia coli DH5 resulted in only insoluble particles (inclusion bodies). IPTG and the additions of glucose, lactose and glycerol and expression under low temperature could not completely inhibit insoluble expression en


Files in this item

Files Size Format View

There are no files associated with this item.

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record

Search DSpace


Advanced Search

Browse

My Account