การประเมินความปลอดภัยของโปรตีน Vip3Aa

กนกพร ศรีสุจริตพานิช; ปนัดดา บุญเสริม; บุญเฮียง พรมดอนกอย

dc.contributor.author	กนกพร ศรีสุจริตพานิช
dc.contributor.author	ปนัดดา บุญเสริม
dc.contributor.author	บุญเฮียง พรมดอนกอย
dc.contributor.other	มหาวิทยาลัยบูรพา. คณะสหเวชศาสตร์
dc.contributor.other	มหาวิทยาลัยมหิดล. สถาบันชีววิทยาศาสตร์โมเลกุล
dc.contributor.other	สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
dc.date.accessioned	2020-08-13T01:40:04Z
dc.date.available	2020-08-13T01:40:04Z
dc.date.issued	2563
dc.identifier.uri	http://dspace.lib.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/3942
dc.description.abstract	แบคทีเรีย Bacillus thuringiensis ผลิตโปรตีนสารพิษ Vip3Aa ซึ่งเป็นโปรตีนที่มีความสามารถในการฆ่าหนอนศัตรูพืช ในอันดับ Lepidoptera ที่มีความสำคัญต่อพืชเศรษฐกิจไทย ได้แก่ กลุ่มหนอนกระทู้และหนอนกอ ในการพัฒนาต่อยอดเป็นชีวภัณฑ์จำเป็นต้องมีข้อมูลด้านพิษวิทยาของโปรตีนสารพิษ ซึ่งในปัจจุบันยังไม่มีข้อมูลนี้เพียงพอสำหรับโปรตีน Vip3Aa งานวิจัยนี้ศึกษาความเป็นพิษของ Vip3Aa และศึกษาสภาพความคงทนต่อสภาวะต่าง ๆ โดยเริ่มจากการผลิตรีคอมบิแนนท์โปรตีน Vip3Aa ใน E. coli พบว่าโปรตีนสามารถแสดงออกมาในรูปแบบละลายน้ำได้ที่ขนาด 90 kDa จากนั้นนำไปทดสอบความคงทนต่ออุณหภูมิ พบว่า Vip3Aa จะสลายไปเมื่ออุณหภูมิสูงขึ้นมากกว่า 75°C ในเวลา 30 นาที และไม่ทนต่อแสง UV เมื่อเวลาผ่านไป 2 วัน ผลการศึกษาความเป็นพิษต่อเซลล์มนุษย์ปกติ ชนิดไฟโบบลาส เมื่อวิเคราะห์ความมีชีวิตของเซลล์ด้วยเทคนิค MTT พบว่าเซลล์ยังมีการเจริญเติบโตปกติเมื่อเทียบกับเซลล์ควบคุมที่ไม่ได้รับโปรตีนสารพิษ ที่ความเข้มข้นสูงสุด 2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร จากผลการทดลองแสดงให้เห็นในเบื้องต้นว่า โปรตีน Vip3A ปลอดภัยต่อเซลล์มนุษย์และไม่ตกค้างในสิ่งแวดล้อมหากนำไปใช้งานจริง	th_TH
dc.description.sponsorship	โครงการวิจัยประเภทงบประมาณเงินรายได้ (เงินอุดหนุนจากรัฐบาล) ประจำปีงบประมาณ พ.ศ. 2562 จากสำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ	th_TH
dc.language.iso	th	th_TH
dc.publisher	คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา	th_TH
dc.subject	แบคทีเรีย	th_TH
dc.subject	ชีวพิษ	th_TH
dc.subject	สาขาเกษตรศาสตร์และชีววิทยา	th_TH
dc.title	การประเมินความปลอดภัยของโปรตีน Vip3Aa	th_TH
dc.title.alternative	Biosafety assessment of Vip3Aa	th_TH
dc.type	Research	th_TH
dc.author.email	kanokporns@go.buu.ac.th	th_TH
dc.author.email	panadda.boo@mahidol.ac.th	th_TH
dc.author.email	boonhiang@biotec.or.th	th_TH
dc.year	2563	th_TH
dc.description.abstractalternative	Bacillus thuringiensis produces vegetative insecticidal protein as Vip3A protein. Vip3A is toxic to important Lepidoptera insect pests of Thailand such as Spodoptera exigua Spodoptera litura etc. To use Vip3Aa toxin as insect pests control, the toxicity information is important. In this study, safety assessment and stability of the toxin was performed. Firstly, recombinant Vip3Aa was produced in E.coli as 90 kDa soluble protein. Vip3A toxin was exposed to high temperature for heat stability test. At 75°C Vip3A was degraded after 30 min. Moreover, Vip3Aa was not stable under UV light after 2 days. Human cell line toxicity test was performed using human fibroblast and cell viability was analyzed using MTT assay. Fibroblast treated Vip3Aa at 2 mg/ml could grow comparable with untreated control. Taken together, Vip3A was not toxic to human cell line and not stable in environment. It can imply that Vip3A safe to human.	en