การผลิตและลักษณะสมบัติของโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไซโตโครม P4501A (CYP1A) ในปลากะพงขาว (Lates calcarifer Bloch) ที่ได้รับสารเบนโซ[เอ]ไพรีน

นันทิกา คงเจริญพร; พอจิต นันทนาวัฒน์; ปภาศิริ กาญจโนภาศ-บาร์เนท; วิชชุดา ประสาทแก้ว

dc.contributor.author	นันทิกา คงเจริญพร
dc.contributor.author	พอจิต นันทนาวัฒน์
dc.contributor.author	ปภาศิริ กาญจโนภาศ-บาร์เนท
dc.contributor.author	วิชชุดา ประสาทแก้ว
dc.contributor.other	มหาวิทยาลัยบูรพา. คณะวิทยาศาสตร์
dc.date.accessioned	2019-03-25T09:18:53Z
dc.date.available	2019-03-25T09:18:53Z
dc.date.issued	2557
dc.identifier.uri	http://dspace.lib.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/2800
dc.description.abstract	การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่มีความจำเพาะต่อไซโตโครม P4501A (CYP1A) ของปลากะพงขาว (Lates calcarifer Bloch) ที่ได้รับสารเบนโซ[เอ] ไพรีน โดยการฉีดกระตุ้นหนูขาวด้วย CYP1A จากตับปลากะพงขาวสกัด จำนวน 4 ครั้ง จากนั้นนำม้ามหนูที่ตอบสนองต่อแอนติเจนมาหลอมกับ myeloma เพื่อผลิตเซลล์ลูกผสม คัดเลือกโคลนที่มีคุณสมบัติจำเพาะต่อ CYP1A จากตับปลากะพงขาวสกัด ที่มีน้ำหนักโมเลกุล 56 และ 74 กิโลดาลตัน โดยเทคนิค dot blot และ western blot พบโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่มีความจำเพาะต่อ CYP1A จำนวน 3 โคลน ได้แก่ MAb- sea bass CYP1A 1.4-3D, 2.3-4G-6E และ 155-4D ที่มีไอโซไทป์ เป็น IgG1, IgG1 และ IgM ตามลำดับ โมโนโคลนอล ที่ผลิตได้นี้จัดได้เป็ น 2กลุ่มตามความจำเพาะของ CYP1A ในรูปแบบเสียสภาพ (denatured) และรูปแบบไม่เสียสภาพ (native form) ได้แก่ กลุ่มที่ 1จำเพาะต่อ CYP1A ในรูปแบบเสียสภาพเท่านั้น มี 2 โคลน ได้แก่ MAb-sea bass CYP1A 1.4-3D และ 2.3-4G-6E และกลุ่มที่ 2 จำเพาะต่อ CYP1A ทั้งในรูปแบบเสียสภาพ และรูปแบบไม่เสียสภาพ มี 1 โคลน ได้แก่ MAb-sea bass CYP1A 155-4D ซึ่งแอนติบอดีที่ผลิตได้นี้ สามารถนำไปใช้ตรวจสอบ CYP1A ได้ด้วยเทคนิค dot blot, western blot และ immunohistochemistry หรือพัฒนาเทคนิค ELISA ได้ต่อไป นอกจากนี้ พบว่า โมโนโคลนอล แอนติบอดีที่ผลิตได้ทั้ง 3 โคลน มีสมบัติในการเกิดปฏิกิริยาข้ามกลุ่มได้กับปลาทะเลชนิด ต่าง ๆ ปลาน้ำกร่อย และปลาน้ำจืดบางชนิดได้	th_TH
dc.language.iso	th	th_TH
dc.subject	ปลากะพงขาว	th_TH
dc.subject	สาขาเกษตรศาสตร์และชีววิทยา	th_TH
dc.subject	โมโนโคลนอลแอนติบอดีย์	th_TH
dc.subject	ไซโตโครมพี-450	th_TH
dc.title	การผลิตและลักษณะสมบัติของโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไซโตโครม P4501A (CYP1A) ในปลากะพงขาว (Lates calcarifer Bloch) ที่ได้รับสารเบนโซ[เอ]ไพรีน	th_TH
dc.type	บทความวารสาร	th_TH
dc.issue	2
dc.volume	19
dc.year	2557
dc.description.abstractalternative	Monoclonal antibodies specific to cytochrome P4501A of Asian sea bass (Lates calcarifer Bloch) exposed to benzo[a]pyrene were generated from a mouse immunized with fish liver cytochrome P4501A extracts. The spleen was fused with myelomas to provide hybridomas. Hybridomas were screened by dot blot and western blot against Asian sea bass CYP1A extracts. Three clones of monoclonal antibodies (MAb-sea bass CYP1A1.4-3D, 2.3-4G-6E and 155-4D) specific to Asian sea bass CYP1A (54 and 76 kDa) were obtained and the isotyping were IgG1, IgG1 and IgM, respectively. They were divided into 2 groups according to their specific binding to denatured and native form of CYP1A. The first group of antibodies (1.4-3D, 2.3-4G-6E) recognized only denatured form and the second group (155-4D) recognized both denaturedand native form of CYP1A. The monoclonal antibodies can use for CYP1A detection by antibody techniques such as dot blot, western blot and immunohistochemistry or develops for ELISA. In addition, all clones of monoclonal antibodies were cross-reacted with liver cytochrome P4501A from some marine, brackish or freshwater fishes.	en
dc.journal	วารสารวิทยาศาสตร์บูรพา = Burapha science journal
dc.page	1-13.