dc.contributor.author |
ชูตา บุญภักดี |
|
dc.contributor.other |
มหาวิทยาลัยบูรพา. คณะวิทยาศาสตร์ |
|
dc.date.accessioned |
2019-03-25T09:09:58Z |
|
dc.date.available |
2019-03-25T09:09:58Z |
|
dc.date.issued |
2559 |
|
dc.identifier.uri |
http://dspace.lib.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/1935 |
|
dc.description.abstract |
การผลิตรีคอมบิแนนท โปรตีน (recombinant protein) ของอินซูลินไลท โกรทแฟคเตอร วัน (Insulin-like growth factor-I; IGF-I) ซึ่งเป็นฮอร์โมนประเภทเปปไทด ที่ส่วนใหญ่ผลิตออกมาจากตับเมื่อถูกกระตุ้นด้วยโกรทฮอร์โมน โดยทำการโคลนยีน IGF-I จาก complementary DNA (cDNA) ของปลาการ์ตูนส้มขาว (Amphiprion ocellaris) ที่สามารถแปรรหัสได้เป็นโปรตีนสมบูรณ์ โดยใช้ pETSUMO เป็นดีเอ็นเอพาหะ รีคอมบิแนนท โปรตีน IGF-I (rIGF-I) ที่ผลิตได้อยู่ในสภาพละลายง่ายและแสดงออกในเซลล์ แบคทีเรีย Escherichia coli BL21 เมื่อเจริญเซลล์ ตั้งต้น 10 มิลลิลิตร เหนี่ยวนำด้วย isopropyl-β-thiogalactoside ความเข้มข้น 0.1 mM สามารถผลิต rIGF-I ได้ประมาณ 0.5 มิลลิกรัม เมื่อนำ rIGF-I ไปทำการทดสอบคุณสมบัติทางชีวภาพโดยผสมกับอาหารในระดับ 1, 0.1 และ 0.01 μg/g bwt/day ให้ปลากินติดต่อกัน 4 สัปดาห์ วัดอัตราการเจริญเติบโตสัมพัทธ์ (relative growth rate; RGR) การเจริญเติบโตจำเพาะ (specific growth rate; SGR) อัตราการเปลี่ยนอาหารเป็นเนื้อ (feed conversion rate, FCR) และประสิทธิภาพการใช้อาหาร (feed efficiency, FE) และระดับการแสดงออกของยีน insulin-like growth factor-I (IGF-I) และ vitellogenin (VTG) ด้วยวิธี quantitative SYBR® real-time PCR ผลการทดสอบพบว่า rIGF-I มีแนวโน้มเพิ่มอัตราการเจริญเติบเติบโตของปลาการ์ตูนส้มขาว และ rIGF-I ที่ระดับความเข้มข้น 1 μg/g bwt/day มีอัตราการเปลี่ยนอาหารเป็นเนื้อและมีประสิทธิภาพการใช้อาหารมากที่สุด แต่ระดับการแสดงออกของยีน IGF-I และ VTG ต่ำสุด |
th_TH |
dc.description.sponsorship |
โครงการวิจัยประเภทงบประมาณเงินรายได้ จากเงินอุดหนุนรัฐบาล (งบประมาณแผ่นดิน) ประจำปีงบประมาณ พ.ศ. 2558 |
en |
dc.language.iso |
th |
th_TH |
dc.publisher |
คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา |
th_TH |
dc.subject |
ปลาการ์ตูนส้มขาว |
th_TH |
dc.subject |
สาขาเกษตรศาสตร์และชีววิทยา |
th_TH |
dc.title |
โครงการการผลิตรีคอมบิแนนท์โปรตีนอินซูลินไลท์โกรทแฟคเตอร์วันของปลาการ์ตูนส้มขาว (Amphiprion ocellaris) |
th_TH |
dc.title.alternative |
Construction of the recombinant Insulin-like growth factor-I protein of the false clown anemonefish (Amphiprion ocellaris) |
en |
dc.type |
Research |
|
dc.year |
2559 |
|
dc.description.abstractalternative |
Construction of the recombinant protein of Insulin-like growth factor-I (IGFI), a polypeptide hormone mainly produced by the liver in response to the endocrine growth hormone stimulus, was conducted. In this study, the clown anemonefish (Amphiprion ocellaris) IGF-I complementary DNA (cDNA) encoding the
mature protein was cloned in a pETSUMO expression vector and expressed in Escherichia coli BL21 cells as a soluble protein upon induction with 0.1 mM isopropyl-β-D-thiogalactoside. The yield of the recombinant IGF-I (rIGF-I) after key
steps in the overall purification process is approximately 0.5 mg /10 ml bacterial cells. The biological activity of the purified rIGF-I was assessed by oral administration on the 2- month old fish. Three doses of rIGF-I (1, 0.1 and 0.01 μg/g body weight
(bwt)/day) and 0 μg/g rIGF-I was used as a control, were administered for over 4 weeks and continuing without feeding with rIGH-I for another 4 weeks. Fish growth performance was measured by relative growth rate (RGR), specific growth rate (SGR), feed conversion rate (FCR) and feed efficiency (FE). Quantitative expression analysis
by SYBR® real-time PCR of the IGF-I and vitellogenin (VTG) genes was also investigated. The results showed the rIGF-I tend to enhance the growth of the clown anemonefish. The 1 μg/g of rIGF-I provided the highest feed conversion rate and feed efficiency but showed the lowest expression of IGF-I and VTG genes |
en |