dc.contributor.author |
จิตติมา เจริญพานิช |
|
dc.contributor.author |
ศรีสุดา นิเทศน์ธรรม |
|
dc.contributor.author |
เอมม่า อาสนาจินดา |
|
dc.contributor.other |
มหาวิทยาลัยบูรพา. คณะวิทยาศาสตร์ |
|
dc.contributor.other |
มหาวิทยาลัยบูรพา. คณะวิศวกรรมศาสตร์ |
|
dc.date.accessioned |
2019-03-25T09:09:52Z |
|
dc.date.available |
2019-03-25T09:09:52Z |
|
dc.date.issued |
2558 |
|
dc.identifier.uri |
http://dspace.lib.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/1838 |
|
dc.description.abstract |
การฟอกหนังเป็นอุตสาหกรรมพื้นฐานที่พบได้ ทั่วโลกซึ่งมีการปลดปล่อยสารปนเปื้อนความเข้มข้นสูงที่เป็นมลพิษและย่อยสลายทางชีวภาพได้ต่ำออกมากับน้ำทิ้งระหว่างกระบวนการฟอกหนัง นำมาสู่ปัญหาในการกำจัดและหนึ่งในของเสียหลักที่มีการปลดปล่อยออกมาก็คือสารอินทรีย์ เช่น โปรตีนและคาร์โบไฮเดรต ที่ไปลดปริมาณออกซิเจนที่ละลายน้ำของแหลงน้ำได้ โดยทั่วไปการบำบัดน้ำทิ้งจากกระบวนการฟอกหนังจะใช้ วิธีทางกายภาพ-เคมีและวิธีการทางชีวภาพ หรือใช ้ทั้งสองวิธีรวมกันแต่ก็ยังไม่สามารถกำจัดสารปนเปื้อนได้ อย่างสมบูรณ์ โครงการวิจัยนี้จึงสนใจที่จะสร้างท่อบำบัดน้ำทิ้งที่เกิดจากกระบวนการฟอกหนัง โดยในปีที่หนึ่งจะมุ่งเป้าไปที่การหาแบคทีเรียใต้ทะเลที่สามารถขับเอนไซม์โปรติเอสที่มีประสิทธิภาพสูงออกมานอกเซลล์ เพื่อนำมาประยุกต์ใช้ ในการบำบัดน้ำทิ้งจากกระบวนการฟอกหนังในรูปแบบท่อต่อไป ผลการทดลองพบแบคทีเรียจำนวน 2 ไอโซเลทที่สามารถผลิตเอนไซม์โปรติเอสได้ และมีการระบุชนิดจากคุณลักษณะทางชีวเคมีและลำดับนิวคลีโอไทด์ในบริเวณอนุรักษ์ของชิ้นยีน 16S rRNA ได้ เป็น Staphylococcus saprophyticus และ Bacillus subtilis ตามลำดับ S. saprophyticus ขับเอนไซม์โปรติเอสที่สามารถทำงานได้ ดีในค่าพีเอชช่วงกว้างคือ ค่าพีเอช 3.0-12.0 และในช่วงอุณหภูมิ 10-80 องศาเซลเซียส เอนไซม์ถูกทำบริสุทธิ์เพิ่มขึ้น 70 เท่า ด้วยการตกตะกอนเกลือแอมโมเนียมซัลเฟตอิ่มตัวร้อยละ 70-80 และคอลัมน์โครมาโทรกราฟแบบคัดกรองขนาด พบเอนไซม์มีมวลโมเลกุลสัมพัทธ์ 28 กิโลดาลตัน และมีความเสถียรในช่วงค่าพีเอชที่เป็นด่างคือ ค่าพีเอช 6.0-9.0 เป็นเวลา 6 ชั่วโมง และยังคงรักษาความเสถียรได้ ในช่วงอุณหภูมิสูง 60-80 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 72 ชั่วโมง โลหะไอออน (Na+, Ba2+, Ca2+, Mg2+, Hg2+) ไม่ส่ งผลต อแอคติวิตีของเอนไซม์แต กลับเสริมการทำงานของเอนไซม์ นอกจากนี้ยังพบว่าเอนไซม์มีความเสถียรในสภาวะที่มีดีเทอร์เจนท์ เช่น SDS, H2O2 และ Zeolite รวมทั้งรักษาความเสถียรได้ในตัวทำละลายอินทรีย์ที่ไม่มีขั้ว เช่น เบนซีน เฮกเซน เฮกซาเดคเคน อีกด้ วย สำหรับเอนไซม์โปรติเอสจาก B. subtilis ถูกทำบริสุทธิ์เพิ่มขึ้น 14 เท่าด้วยการตกตะกอนเกลือแอมโมเนียมซัลเฟตอิ่มตัวร้อยละ 80-90 และคอลัมน์โครมาโทรกราฟแบบคัดกรองขนาดเช่นกัน เอนไซม์โปรติเอสบริสุทธิ์ มีขนาดประมาณ 30 กิโลดาลตัน และสามารถเร่งปฏิกิริยาได้ ดีกับสับสเตรทอะโซเคซีนที่ค่าพีเอช 11.0 และอุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียส โดยมีความเสถียรในค่าพีเอชช่วงด่างคือ ค่าพีเอช 8.0-11.0 เป็นเวลา 6 ชั่วโมง และในช่วงอุณหภูมิสูง 60-70 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 72 ชั่วโมง นอกจากนี้ยังพบว่าตัวยับยั้ง ดีเทอร์เจนท์ และสารฟอกขาว ไม่ส่งผลต่อการทำงานของเอนไซม์ และเอนไซม์ยังคงรักษาความเสถียรได้ ในสภาวะที่มีตัวทำละลายอินทรีย์ที่ไม่มีขั้วและโลหะไอออนอีกด้วยจากสมบัติในการรักษาความเสถียรในค่าพีเอชและอุณหภูมิช่วงกว้าง และความสามารถในการเร่งปฏิกิริยาในสภาวะที่มีโลหะไอออน ตัวทำละลายอินทรีย์ และดีเทอร์เจนท์ แสดงให้เห็นถึงศักยภาพของเอนไซม์โปรติเอสจากแบคทีเรียทั้งสองชนิดที่สามารถเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพที่มีประสิทธิภาพสำหรับประยุกต์ใช้ ในระดับอุตสาหกรรมได้ |
th_TH |
dc.description.sponsorship |
โครงการวิจัยประเภทงบประมาณเงินรายได้จากเงินอุดหนุนรัฐบาล (งบประมาณแผ่ นดิน) ประจำปีงบประมาณ พ.ศ. 2558 |
en |
dc.language.iso |
th |
th_TH |
dc.publisher |
คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา |
th_TH |
dc.subject |
การบำบัดน้ำเสีย |
th_TH |
dc.subject |
การฟอกหนัง |
th_TH |
dc.subject |
สาขาวิทยาศาสตร์เคมีและเภสัช |
th_TH |
dc.title |
การสร้างท่อบำบัดน้ำทิ้งที่เกิดจากกระบวนการฟอกหนัง |
th_TH |
dc.title.alternative |
Construction of an inline remover for tannery effluent treatment |
en |
dc.type |
Research |
|
dc.author.email |
jittima@buu.ac.th |
|
dc.author.email |
srisudas@buu.ac.th |
|
dc.author.email |
emma@buu.ac.th |
|
dc.year |
2558 |
|
dc.description.abstractalternative |
Leather tanning is a wide common industry all over the world. The high concentrations of pollutants with low biodegradability in tannery wastewater represent a serious and actual technological and environmental challenge. One of the majority wastes associated with leathermaking process is organic matter (e.g. proteins and carbohydrates) which is the depression of the
dissolved oxygen content of stream waters caused by microbial decomposition. Tannery wastewater is generally treated by various physic-chemical and biological methods and by a combination of both, but often do not destroy contaminants. This study aims to construct an inline remover for tannery effluent treatment. Since proteases are envisaged to have extensive
application in leather industry we initially focus on screening of marine bacterium that shows ability to secrete high potent protease. Two isolates were found to produce protease. Identification based on biochemical characteristics and 16S rRNA gene sequence identified the strains as Staphylococcus saprophyticus and Bacillus subtilis, respectively. S. saprophyticus secreted a broad range pH (pH 3.0-12.0) and temperature (10-80 °C) active protease. The protease was successfully purified 70-fold to homogeneity by 70-80% ammonium sulfate precipitation and gel-permeable column chromatography. The enzyme
possessed a relative molecular mass of 28 kDa. The enzyme was stable at alkali pH (6.0-9.0) for 6 h and a variety of high temperature between 60 and 80 °C for 72 h. Metal ions (Na+, Ba2+, Ca2+, Mg2+, Hg2+) did not affect the enzyme activity in contrast improve the activity. The enzyme was stable in detergents (SDS, H2O2, Zeolite etc.) and hydrophobic solvents (benzene, hexane, hexadecane etc.). The protease of B. subtilis was successfully purified 14-fold by 80-90% ammonium
sulphate precipitation and gel-permeable column chromatography. The purified protease possessed a relative molecular mass of 30 kDa. Higher protease activity was determined at pH 11.0 and 50 °C with azocasein as a substrate. The enzymes was stable at alkali pH (8.0-11.0) for 6 h and at a variety of high temperature between 60 and 70 °C for 72 h. Protease inhibitors, detergents and bleaching agents did not affect the enzyme activity. The enzyme was also stable
in hydrophobic solvents and metal ions. Broad range pH and temperature stability and ability to work in metal ions, solvents and detergents support the potential of both proteases as a vigorous biocatalyst for industrial applications. |
en |