การตรวจวิเคราะห์การปนเปื้อนของบาซิลลัสรูปแบบใหม่และมีประสิทธิภาพสูง
โดยอาศัยการเพาะเลี้ยงเชื้อขนาดเล็กร่วมกับอาหารบ่งชี้ที่มีสี

อาลักษณ์ ทิพยรัตน์

dc.contributor.author	อาลักษณ์ ทิพยรัตน์
dc.contributor.other	มหาวิทยาลัยบูรพา. คณะวิศวกรรมศาสตร์
dc.date.accessioned	2019-07-14T03:05:09Z
dc.date.available	2019-07-14T03:05:09Z
dc.date.issued	2562
dc.identifier.uri	http://dspace.lib.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/3617
dc.description.abstract	โดยปกติแล้ว กระบวนการคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์ Bacillus cereus จะใช้เพียง polymyxin B sulfate เข้มข้น 10 mg/L เท่านั้นที่ความเข้มข้นระดับนี้เชื้อ B. cereus จะเจริญได้ตามปกติแต่เชื้อแข่งขัน กลุ่มแกรมบวกอื่น ๆ ก็สามารถเจริญได้เช่นกัน ส่งผลให้เกิดความลำบากในการวิเคราะห์ผล โดยเฉพาะอย่างยิ่งกับตัวอย่างในอุตสาหกรรมที่ต้องการความถูกต้องและรวดเร็ว งานวิจัยยังมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาปัจจัยของจำนวนเชื้อจุลินทรีย์เริ้มต้น และความเข้มข้น ของสารยับยั้งชนิดต่าง ๆ ที่มีผลต่อการเจริญของเชื้อจุลินทรีย์ B. cereus ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ทำการคัดเลือกชนิดเหลว สารยับ ยั้งทั้ง 5 ชนิดที่ใช้ในการทดลอง ได้แก่ ceftriaxone, polymyxin B sulfate, trimethoprim, novobiocin, และ amoxicillin ที่ระดับความเข้มข้น เท่ากับที่ใช้ตามมาตรฐาน (10 mg/L) ครึ่งหนึ่งของมาตรฐาน (5 mg/L) และสูงกว่ามาตรฐานหนึ่งเท่า (20 mg/L) ความเข้มข้นของเชื้อ B. cereus ที่ศึกษา ได้แก่ 10, 103, และ 105 CFU/mL โดยทำการศึกษาในอาหารเหลวชนิด Tryptic Soy Broth (TSB) และทำการนับจำนวนบนอาหารเลี้ยงเชื้อชนิด Tryptic Soy Agar (TSA) หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส นาน 24 ชั่วโมง จากผลการทดลองพบว่า ceftriaxone, polymyxin B sulfate, และ trimethoprim เป็นสารยับยั้งที่ให้ผลดีที่สุด ซึ่งไม่ส่งผลต่อการเจริญของ B. cereus อย่างไรก็ตาม trimethoprim ไม่ส่งผลในการยับย้ังเชื้อจุลินทรีย์อื่น ๆ ได้แก่ Escherichia coli และ Staphylococcus aureus เช่นกันสำหรับ novobiocin และ amoxicillin ออกฤทธิ์ในการยั่บยั้ง B. cereus อยา่งรุนแรงที่ความเข้มข้นเชื้อต่ำในทุก ๆ ความเข้มข้น ของสารยับยั้ง อาหารเลี้ยงเชื้อมาตรฐานที่ใช้ในการคัดเลือกเชื้อ B. cereus คือ pyruvate polymyxin egg yolk mannitol bromothymol blue agar (PEMBA) ซึ่งใช้น้ำตาลแมนนิทอลเป็นแหล่งคาร์บอน ซึ่งเชื้อ จุลินทรีย์ส่วนใหญ่ยกเว้น B. cereus สามารถผลิตกรดจากน้ำตาลชนิดนี้ได้ นอกจากนี้การใช้อินเคเตอร์ชนิด bromothymol blue ทำให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลลข์ อง B. cereus มากกว่าการใช้อินดิเคเตอร์ neutral red ดังนั้นการใช้น้ำตาลแมนนิทอล และ bromothymol blue จึงไม่เหมาะสมต่อการพัฒนาอาหารคัดเลือกชนิดเหลว	th_TH
dc.description.sponsorship	งานวิจัยนี้ได้รับทุนสนับสนุนการวิจัย จากงบประมาณเงินรายได้ (เงินอุดหนุนจากรัฐบาล) ประจำปีงบประมาณ พ.ศ. 2561 มหาวิทยาลัย บูรพา ผ่านสำนักงานคณะกรรมการการวิจัยแห่งชาติ	th_TH
dc.language.iso	th	th_TH
dc.publisher	คณะวิศวกรรมศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา	th_TH
dc.subject	สาขาวิทยาศาสตร์เคมีและเภสัช
dc.title	การตรวจวิเคราะห์การปนเปื้อนของบาซิลลัสรูปแบบใหม่และมีประสิทธิภาพสูง โดยอาศัยการเพาะเลี้ยงเชื้อขนาดเล็กร่วมกับอาหารบ่งชี้ที่มีสี	th_TH
dc.title.alternative	Novel method for Bacillus cereus detection using microscale cultivation and presumptive indicator media	th_TH
dc.type	Research	th_TH
dc.author.email	aluck@eng.buu.ac.th
dc.year	2562	th_TH
dc.description.abstractalternative	Conventionally, the selectivity of Bacillus cereus in the enrichment step is only limited to the addition of 10 mg/L polymyxin B sulfate. At this concentration, the growth of B. cereus is compromised and its selectiveness against other competing Gram-positive bacteria for industrial food samples is disputable. This research was aimed to study the effects of initial cell concentration and concentration of selective inhibitors on the recovery of B. cereus in selective enrichment step. The inhibitory effect of five conventional and alternative inhibitors (i.e., ceftriaxone, polymyxin B sulfate, trimethoprim, novobiocin, and amoxicillin) was evaluated at different initial cell densities (10, 103, and 105 CFU/mL) to determine the optimal B. cereus inhibitors and their suitable dosage. These selective inhibitors were added to Tryptic Soy Broth (TSB) and the recovery of B. cereus was evaluated using viable cell count on Tryptic Soy Agar (TSA). The concentrations of these selected inhibitors were formulated by doubling the suggested strength (recommended by most standard enrichment protocols) and reducing the standard concentration by half. Hence, the treatment of inhibitors was varied at 5, 10, and 20 mg/L. The cell recovery was performed at 30 oC for 24 h. The only promising candidates of selective inhibitors for B. cereus recovery were ceftriaxone, polymyxin B sulfate, and trimethoprim. Trimethoprim did neither promote the growth of B. cereus nor suppress the growth of E. coli and S. aureus. At low initial cell concentrations, no viable B. cereus cell was detected in all novobiocin and amoxicillin treatments. Mannitol was the standard carbon source in pyruvate polymyxin egg yolk mannitol bromothymol blue agar (PEMBA) and utilizable by E. coli and S. aureus but did not promote the growth of B. cereus. Bromothymol blue was more toxic and produced poorer recovery of B. cereus than neutral red. Hence, both mannitol and bromothymol blue in PEMBA are poor choices as a carbonaceous source and an indicator for B. cereus selective broth, respectively	en