โครงการวิจัย การพัฒนาอาหารเหลวสำหรับการตรวจสอบเชื้อจุลินทรีย์ Vibrio parahaemolyticus แบบมีอินดิเคเตอร์สีเพื่อบ่งบอกการปนเปื้อนอย่างรวดเร็วในอุตสาหกรรมอาหาร

อาลักษณ์ ทิพยรัตน์; อาณัติ ดีพัฒนา

dc.contributor.author	อาลักษณ์ ทิพยรัตน์
dc.contributor.author	อาณัติ ดีพัฒนา
dc.date.accessioned	2025-10-07T04:24:36Z
dc.date.available	2025-10-07T04:24:36Z
dc.date.issued	2559
dc.identifier.uri	https://buuir.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/17497
dc.description.abstract	วิธีการวิเคราะห์ที่เป็นมาตรฐานของ V. parahaemolyticus ในตัวอย่างอาหารประกอบด้วยขั้นตอนการเพิ่มจำนวนในอาหารเหลวเป็นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้นตัวอย่างอาหารเหลวดังกล่าวถูกนำมาคัดแยกเชื้อในอาหารแข็งรวมเวลาที่ใช้ในการวิเคราะห์ประมาณ 3 วัน จึงจะได้ผลการบ่งบอกการติดเชื้อเบื้องต้น ซึ่งใช้เวลานานและขั้นตอนการดำเนินงานมีความยุ่งยากในการที่จะวิเคราะห์ตัวอย่างจำนวนมาก เพื่อความปลอดภัยในผลิตภัณฑ์อุตสาหกรรมอาหารทะเล ในงานวิจัยนี้จึงได้พัฒนาเทคนิคการเลี้ยงเชื้อในอาหารเหลวบ่งชี้เบื้องต้น เพื่อเป็นแนวทางเลือกหนึ่งสำหรับใช้ในการตรวจสอบการปนเปื้อนของ V. parahaemolyticus สำหรับการพัฒนาสูตรอาหารเหลวบ่งชี้ชนิดใหม่นั้น ได้อาศัยหลักการของปฏิกริยา Esculin hydrolysis ซึ่งสามารถบ่งชี้การปนเปื้อนได้จากการเปลี่ยนสีของอาหารเหลวเป็นสีดำซึ่งเป็นผลพลอยได้จาก esculin-ferric ammonium citrate การอ่านผลโดยรวมจากอาหารเหลวบ่งชี้ที่มีส่วนผสมของโซเดียมคลอไรด์และระดับของความเป็นกรด-ด่างที่เหมาะสมนั้น ทำให้สามารถจำแนกกลุ่ม V. parahaemolyticus ที่สามารถใช้ esculin ออกจากกลุ่มแบคทีเรียที่ไม่สามารถใช้ esculin ได้ เมื่อตรวจวัดสมบัติทางแสงของระบบบ่งชี้ในอาหารที่มีการเพาะเลี้ยง V. parahaemolyticus โดยวิธีทางสเปคโตรโฟโตรเมตรี พบว่าความยาวคลื่นแสงที่เหมาะสมที่สุดในการบ่งชี้ปฏิกิริยา Esculin hydrolysis คือ 450 นาโนเมตร (เฟอร์ริกแอมโมเนียมซิเตรทเป็นอินดิเคเตอร์) โดยสามารถตรวจวัดปฏิกิริยาได้ภายใน 24 ชั่วโมง และให้ปริมาณเซลล์ที่สูงหลังจากการบ่มที่ 106-107 CFU/ml ในการพัฒนาสูตรอาหารเหลวสำหรับบ่งชี้เบื้องต้นของอาหารเหลว Esculin พบว่าส่วนผสมของอาหารที่ความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ 6% ระดับความเป็นกรด-ด่างที่ 10 มีประสิทธิภาพสูงสุดในการเพิ่มจำนวน V. parahaemolyticus และสามารถคัดเลือกเชื้ออื่น ๆ ได้ดีที่สุด นอกจากนี้ยังได้มีการพัฒนาความเข้มของสีอาหารเหลวด้วยการศึกษาชนิดของน้ำตาลที่เหมาะสมพบว่า น้ำตาลอะราบิโนส ช่วยเพิ่มความสามารถในการเกิดปฏิกริยา Esculin hydrolysis ผลจากงานวิจัยนี้แสดงให้เห็นเบื้องต้นว่า วิธีการใหม่ในการตรวจวิเคราะห์การปนเปื้อนของ V. parahaemolyticus สามารถตอบโจทย์เป้าหมายของงานวิจัย คือ มีความสะดวกในการวิเคราะห์ และให้ผลการทดสอบรวดเร็ว โดยให้ผลเบื้องต้นในอาหารเหลวในวันแรกของการทดสอบ ในขณะที่วิธีการมาตรฐานนั้นจำเป็นต้องใช้เวลาอย่างน้อย 2 วัน	th_TH
dc.description.sponsorship	สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ	th_TH
dc.language.iso	th	th_TH
dc.publisher	คณะวิศวกรรมศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา	th_TH
dc.subject	อาหาร -- การเจือปนและการตรวจสอบ	th_TH
dc.subject	การปนเปื้อนในอาหาร	th_TH
dc.subject	จุลินทรีย์ในอาหาร -- การตรวจสอบ	th_TH
dc.title	โครงการวิจัย การพัฒนาอาหารเหลวสำหรับการตรวจสอบเชื้อจุลินทรีย์ Vibrio parahaemolyticus แบบมีอินดิเคเตอร์สีเพื่อบ่งบอกการปนเปื้อนอย่างรวดเร็วในอุตสาหกรรมอาหาร	th_TH
dc.title.alternative	Development of chromogenic enrichment broth for Vibrio parahaemolyticus to facilitate early-warning detection in food industry	th_TH
dc.type	Research	th_TH
dc.year	2559	th_TH
dc.description.abstractalternative	Conventional methods for V. parahaemolyticus detection in food samples require a liquid enrichment step followed by agar culture with the total analytical time of 3 days to obtain presumptive results. Such lengthy and complex procedures compromise productivity and food safety of the seafood industry. In this paper, the use of esculin hydrolysis was proposed to provide a primary screening of V. parahaemolyticus contamination in industrial samples. This research explored alternative rapid screening strategies of V. parahaemolyticus detection by the occurrence of blackened broth as a result of the esculin-ferric ammonium citrate reaction. V. parahaemolyticus as well as other Gram-positive competitors and Gram-negative non- V. parahaemolyticus bacteria were cultured in these substrates and incubated at 37C for 24 h. Viable cell count and broth color were monitored using the micro scale cultivation technique and spectrophotometer at discrete wavelengths from 340 to 650 nm, respectively. The results showed that the optimal signal in detecting esculin activity was at 450 nm and detected as early as 18-24 h after incubation. All tested strains grew very well in these broths maintaining high viable cell counts (106-107 CFU/ml). The esculin activity itself was able to differentiate Gram-negative from – positive due to the lack of -glucosidase (no dark brown broth for E. coli). In this developed esculin based broth, the concentrations of sodium chloride (3, 6, 8 and 10% w/v) and pH values (7, 8, 9, and 10) were varied to determine the most optimal selectivity towards V. parahaemolyticus selection. The optimized esculin-ferric ammonium citrate based broth, named EFA (esculin, ferric ammonium citrate, and arabinoe), effectively increased black color and OD450 of V. parahaemolyticus and displayed good selectivity. The modified esculin broth was able to presumptively screen the presence of V. parahaemolyticus in industrial food samples within 1 day in contrast to the conventional method.	th_TH