ฤทธิ์ต้านมะเร็งและกลไกการออกฤทธิ์ระดับโมเลกุลของสารเมตาโบไลท์ที่ออกฤทธิ์ชีวภาพ จากแอคติโนแบคทีเรียในซับออร์เดอร์ Micromonosporineae ที่แยกจากตะกอนทะเล

จันทรวรรณ แสงแข; รัตนาภรณ์ ศรีวิบูลย์

dc.contributor.author	จันทรวรรณ แสงแข	th
dc.contributor.author	รัตนาภรณ์ ศรีวิบูลย์	th
dc.contributor.other	มหาวิทยาลัยบูรพา. คณะสหเวชศาสตร์
dc.date.accessioned	2019-03-25T08:54:46Z
dc.date.available	2019-03-25T08:54:46Z
dc.date.issued	2554
dc.identifier.uri	http://dspace.lib.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/834
dc.description.abstract	บทนำ จุลินทรีย์แกรมบวกเช่น Actinomycetes เป็นแหล่งผลิตสาร secondary metabolites ซึ่งออกฤทธิ์ชีวภาพโดยเฉพาะสารต้านเซลล์มะเร็ง และแอดติโนมัยซีทในทะเลโดยเฉพาะ Micromonospora sp. มีความหลากหลายของชนิด มีแนวโน้มสร้างสารเมตาโบไลท์อันดับสองชนิดใหม่ ๆ ที่มีศักยภาพสูงในการพัฒนาเป็นยาต้านมะเร็ง วัตถูประสงค์ เพื่อศึกษาประสิทธิภาพยับยั้งการเจริญของ KB calls ในระดับหลอดทดลอง และศึกษากลไลการตายระดับโมเลกุลแบบ apoptosis ของสารสกัดจาก Micromonospora ที่แยกจากตะกอนทะเล วิธีการทดลอง นำดินตะกอนก้จทะเลมาคัดเลือกเชื้อใน suborder Micromonosporineae สกัดจากเซลล์และอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย methanol และ ethyl acetate ได้สกัดหยาบ MAG 9-7 และ MAG 9-19 นำมาบ่มกับเซลล์นาน 48 ชั่วโมง ศึกษาการเจริญของเซลล์ด้วย MTT assay นับจำนวนนิวเคลียสที่มีอะโพโทซิสโดยการย้อมสี DAPI วิเคราะห์ผลด้วย fluorescent microscopy ศึกษาการแตกของ DNA โดย agarose gel eletrophoresis ศึกษาวัฏจักรเซลล์โดยการย้อยสี PI วิเคราะห์ผลด้วย flow cytometry จากนั้นวัด caspase-3 activity ผลการทดลอง สารสกัด MAG 9-19 ไม่เป็นพิษต่อเซลล์ ขณะที่ MAG 9-7 มีพิษระดับปานกลาง (IC50 = 83.46+- 3.9 ug/ml) เมื่อนำสารสกัด MAG 9-7 (50 ug/ml) หรือ MAG 9-19 (300 ug/ml) บ่มร่วมกับ dexorubicin (DOX) (1 ug/ml) พบว่าเซลล์มะเร็งตายแบบ apoptotic เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P < 0.05) เมื่อเทียบกับกลุ่มที่ได้รับสารเพียงอย่างเดียว โดยเซลล์ที่ตายหลุดจากพื้นผิวง่าย มี apoptotic body พบโครมาตินหนาแน่น นิวเคียสติดสี DAPI เป็นหย่อมๆ มี DNA ฟุ้งกระจายใน agarose gel เพิ่มขึ้นสอดคล้องกับการสะสมเซลล์ในระยะ sub-G1 phase และ caspase-3 activity ที่เพิ่มขึ้น สรุป สารสกัดจาก Micromonospora เพิ่มประสิทธิภาพ DOX ในการเหนี่ยวนำให้เซลลืมะเร็งตายด้วย apoptosis ผ่านทาง caspase-3 dependent pathway จึงมีศักยภาพที่จะนำมาพัฒนาเพื่อให้ร่วมกับเคมีบำบัดเป็นการรักษาแบบผสมผสาน (complementary therapies)	th_TH
dc.description.sponsorship	สนับสนุนโดย สำนักบริหารโครงการวิจัยในอุดมศึกษาและพัฒนามหาวิทยาลัยวิจัยแห่งชาติ สำนักงานคณะกรรมการการอุดมศึกษา	en
dc.language.iso	th	th_TH
dc.publisher	คณะสหเวชศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา	th_TH
dc.subject	ยาต้านมะเร็ง	th_TH
dc.subject	เซลล์มะเร็ง	th_TH
dc.subject	สาขาวิทยาศาสตร์การแพทย์	th_TH
dc.title	ฤทธิ์ต้านมะเร็งและกลไกการออกฤทธิ์ระดับโมเลกุลของสารเมตาโบไลท์ที่ออกฤทธิ์ชีวภาพ จากแอคติโนแบคทีเรียในซับออร์เดอร์ Micromonosporineae ที่แยกจากตะกอนทะเล	th_TH
dc.title.alternative	Anti-cancer activities and molecular mechanisms of bioactive metabolites from actinobacteria in suborder Micromonosporineae isolated from marine sediments	en
dc.type	งานวิจัย
dc.year	2554
dc.description.abstractalternative	Background The marine actinomycetes genus Micromonospora has long been recognized as an important source of its secondary metabolites. It may provide novel structural discovered and hope to improve therapeutic properties. Objective To investigate the anti-cancer activities and molecular mechanisms of the extraction from Micromonosporn in human carinoma of nasopharynx (KB cells) Methods Micromonospora strains (MAG 9-7 & MAG 9-19) were extracted and treated with KB cells. The viable cell number is based on MTT colorimetric assay. Apoptosis was assessed by nuclear staining with DAPI, agarose gel electrophoresis of DNA fre=amentation assay and quantified by flow cytometry analysis of cells stained with propidium iodide. Caspase-3 activity was measured by a colorimetric assay. Results The MAG 9-19 was non-toxic but the extract of MAG 9-7 inhibited KB cells with IC50 of 83.46 +- 3.9. The combined MAG 9-7 (50 ug/ml) or MAG 9-19 (300 ug/ml) with DOX (1 ug/ml) treatment produced greater cytotoxicity associated with the increasing of chromatin condensation, DNA fragmentation and cells in sub-G1 phase compared wuth treating cells with each agent alone. Apoptosis enhancement of combination treatment was accompanied by increasing in the relative activity of caspase-3 which was significantly attenuated in a caspase-3 inhibitor. Conclusions The induction of apoptosis by combined MAG extract + DOX treatment involves the activation of effector caspase-3. Thus, the combination may provide one other important advantage. MAG extract would represent a promising source for its ability to discovery of interesting anticancer compounds. The elucidation of the apoptosis-related other intracellular targets will be addressed in future studies.	en