วิธี duplex RT-PCR-Enzyme-Linked Immunoassay เพื่อตรวจสอบ การปนเปื้อนของไวรัสตับอักเสบชนิดเอและโรตาไวรัสพร้อมกันในหอยนางรมสด

อุไรวรรณ อินทมาโส; วรวัฒน์ สุขคำ; วิทยา ภูมิศักดิ์

dc.contributor.author	อุไรวรรณ อินทมาโส
dc.contributor.author	วรวัฒน์ สุขคำ
dc.contributor.author	วิทยา ภูมิศักดิ์
dc.contributor.other	มหาวิทยาลัยบูรพา. คณะสหเวชศาสตร์
dc.date.accessioned	2019-03-25T09:08:34Z
dc.date.available	2019-03-25T09:08:34Z
dc.date.issued	2558
dc.identifier.uri	http://dspace.lib.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/1693
dc.description.abstract	การตรวจหาการปนเปื้อนของไวรัสในอาหารเป็นประจำในอาหารต้องอาศัยวิธีที่มีประสิทธิภาพและความเร็วในการตรวจสอบ การศึกษานี้ได้นำวิธี duplex RT-PCR มาใช้ในการตรวจสอบการปนเปื้อนของไวรัสตับอักเสบชนิดเอและโรตาไวรัสพร้อมกันในหอยนางรม โดยมีการออกแบบ primer จากบริเวณที่มี การอนุรักษ์ไว้ของไวรัสทั้งสองชนิด (บริเวณ VP4 ของไวรัสตับอักเสบชนิดเอและ VP7 ของโรตาไวรัส) ปฏิกิริยา monoplex RT-PCR มีความไวในการตรวจสอบสารพันธุกรรมของไวรัสตับอักเสบชนิด มากกว่าโรตาไวรัส แต่กลับพอ ๆ กันใน duplex RT-PCR วิธี DNA-ELISA สามารถใช้ในการตรวจสอบความจำเพาะ ผลผลิตที่ได้จากปฏิกิริยา RT-PCR ได้แต่ไม่สามารถเพิ่มความไวในการตรวจสอบการปนเปื้อนของไวรัสจากวิธี RT-PCRได้ สำหรับเทคนิค multiplex RT-PCR และ nested PCR สามารถตรวจพบการปนเปื้อนในหอยนางรมด้วยไวรัสโรตาและไวรัสตับอักเสบเอ เพียงชนิดเดียวหรือทั้งสองชนิดใน 26 จากจำนวนตัวอย่าง ทั้งหมด 41 ตัวอย่างโดยสายพันธุ ของไวรัสโรตาที่พบทั้งหมดเป็น Genotype G1[8] ดังนั้น เทคนิค duplex RT-PCR-DNA-ELISA สามารถใช้ในการยืนยันความจำเพาะผลผลิตจากปฏิกิริยา RT-PCR ได้แต่ duplex RT-nested PCR สามารถนำมาใช้ในการตรวจคัดกรองหอยนางรมที่ปนเปื้อนไวรัสเป้าหมายและ การตรวจสอบ genotype ของไวรัสที่ปนเปื้อนได้ ซึ่งมีประโยชน ในการศึกษาการระบาดของเชื้อด้วย	th_TH
dc.description.sponsorship	ทุนอุดหนุนการวิจัยจากงบประมาณเงินรายได้ที่เป็นเงินอุดหนุนจากรัฐบาล งบประมาณ ปี 2557	en
dc.language.iso	th	th_TH
dc.publisher	คณะสหเวชศาสตร์. มหาวิทยาลัยบูรพา	th_TH
dc.subject	ดีเอนเออีไลซาร์	th_TH
dc.subject	โรตาไวรัส	th_TH
dc.subject	สาขาวิทยาศาสตร์การแพทย์	th_TH
dc.title	วิธี duplex RT-PCR-Enzyme-Linked Immunoassay เพื่อตรวจสอบ การปนเปื้อนของไวรัสตับอักเสบชนิดเอและโรตาไวรัสพร้อมกันในหอยนางรมสด	th_TH
dc.title.alternative	The duplex RT-PCR-Enzyme-Linked Immunoassay for the detection of HAV and rotavirus in oysters.	en
dc.type	งานวิจัย
dc.year	2558
dc.description.abstractalternative	An efficient and rapid virus detection method is required for routine control and risk assessment in food products. In this study, duplex RT-PCR was performed to evaluate the presence of Hepatitis virus (HAV) and rotavirus in harvested oysters. Primers were designed using multiple alignments of target gene sequences (VP4 of HAV and VP7 of rotavirus). Monoplex RT-PCR had more sensitivity in detection of HAV than rotavirus but comparable in detection of both viruses by duplex RT-PCR. DNA-ELISA was shown to confirm the specificity of RT-PCR product but not for increased sensitivity of detection.Overall positive samples, 26 out of 41, were found in oyster samples contaminated with either one or both viruses when detected with duplex-RT-PCR combined with nested PCR. All rotavirus positive samples were found to be group A G1P[8]. Thus duplex RT-PCR combined with DNA-ELISA can be employed to confirm the specificity of RT-PCR product but duplex RT-PCR combined with nested PCR can be used not only as a tool for screening viral contaminations in oysters but also for epidemiological studies.	en